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医疗卫生招聘考试医学基础知识重要考点:痢疾的病原学诊断方法-医学微生物学

2014-01-24 | 网络

对可疑痢疾患者我们要进行如下病原学诊断。

常规细菌学诊断:

(1)标本尽可能在发病早期和用药治疗前收集粪便的脓血、粘液部分。标本采集后,如不能及时送检,必须置于保存液(甘油缓冲液)中。对留取粪便困难者(如中毒性痢)可采用肛门拭子检查。

(2)分离培养将标本立即接种于增菌液增菌培养,转种于选择性培养基,37℃培养18~24h,选取无色半透明菌落,接种鉴别培养基(三糖铁或二糖铁),37℃18~24h,符合典型反应者,再行详细生化试验和血清学鉴定试验以确立菌群、菌型。非典型的志贺菌可通过将其接种于豚鼠眼结膜上,观察24h,如有炎症表现,则为有毒菌株。

快速诊断:

(1)PCR技术:经过治疗的患者,很难分离到可见的细菌时,可采用多聚酶链反应(PCR),检测志贺菌序列以传递性质粒倍增基因来测定志贺菌。

(2)协同凝集试验:用志贺菌IgG抗体与Cowanl葡萄球菌蛋白A结合成为诊断试剂,用来测定病人粪便中有无志贺菌可溶性抗原。

(3)荧光菌球法:将标本接种于含有荧光素标记的志贺菌免疫血清液体培养基中,如标本中有相应型别的志贺菌存在,37℃孵育4~8h,则与荧光抗体凝集成小球,在荧光显微镜下容易识别诊断。

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